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基于分体式泛素膜酵母双杂交(神话)系统:一个强大的工具用于识别蛋白质 - 蛋白质相互作用
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생물학
Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
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Click here for the English version.
基于分体式泛素膜酵母双杂交(神话)系统:一个强大的工具用于识别蛋白质 - 蛋白质相互作用
DOI:
10.3791/1698-v
•
14:04 min
•
February 01, 2010
•
Jamie Snider
2,3
,
Saranya Kittanakom
2,3
,
Jasna Curak
2,3
,
Igor Stagljar
2,3
1
Department of Biochemistry
,
University of Toronto
,
2
Department of Molecular Genetics
,
University of Toronto
,
3
Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR)
,
University of Toronto
Chapters
00:00
Title
01:22
Introduction
01:41
Selection of Bait and Appropriate MYTH System
03:04
Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
03:07
a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
05:30
b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
07:03
Bait Validation
08:10
MYTH Screening
08:12
a. Large Scale Yeast Transformation
11:31
b. Bait Dependency Test
12:54
Representative Results/ Outcome
13:12
Conclusion
Summary
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神话允许的瞬时和稳定的互动模式生物酵母中表达的蛋白质之间的灵敏的检测。它已成功地应用于研究外源性和酵母的完整的膜蛋白,以确定其在高通量的方式相互作用的合作伙伴。
Tags
Split-ubiquitin
Membrane Yeast Two-hybrid
Protein-protein Interactions
MYTH System
Full-length Transmembrane Proteins
Saccharomyces Cerevisiae
Bait Protein
Prey Proteins
Ubiquitin Moieties
Artificial Transcription Factor
Pseudo-ubiquitin Molecule
Deubiquitinating Enzymes
Reporter Gene Expression
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