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Chapters
- 00:00Title
- 00:31Introduction
- 01:05Preparing the pPICZaA Construct
- 02:18Preparation of Electrocompetent Yeast Cells
- 04:04Transformation by Electroporation
- 06:06Protein Expression in Pichia pastoris
- 08:42Results of Recombinant Protein Expression
- 09:02Conclusion
O protocolo descreve a expressão da proteína utilizando a levedura metilotróficas<em> Pichia pastoris</em>. A preparação de células de levedura electrocompetent, a transformação do vetor com o gene de interesse em<em> P. pastoris</em> E purificação do DNA de levedura também são realizados. Ocidental blot e purificação de proteínas construir os últimos passos neste protocolo expressão da proteína.
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Recombinant ProteinsPichia PastorisProtein ExpressionMethylotrophic YeastExpression SystemPost-translational ModificationsProtein FoldingProteolytic ProcessingDisulfide Bond FormationGlycosylationMethanol MetabolismAlcohol Oxidase PromoterMethanol InductionSecretion Of Recombinant ProteinSignal SequenceHeterologous ProteinProtein PurificationVector
