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Fotoconversione di proteine ​​purificate fluorescenti ed evidenziazione ottica dual-sonda in cellule vive
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JoVE 신문 생물학
Photoconversion of Purified Fluorescent Proteins and Dual-probe Optical Highlighting in Live Cells
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Fotoconversione di proteine ​​purificate fluorescenti ed evidenziazione ottica dual-sonda in cellule vive

DOI:
10.3791/1995-v

•

11:21 min

•

June 26, 2010

•

,
1Department of Molecular Physiology and Biophysics,Vanderbilt University

Chapters

  • 00:03Title
  • 00:57Introduction
  • 01:26Preparing Fluorescent Protein Droplet Samples
  • 03:59Setting up a Photoconversion Experiment
  • 06:57Dual-Probe Optical Highlighting
  • 09:09Representative Results
  • 10:48Conclusion

Summary

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Questo protocollo descrive un approccio generale per eseguire fotoconversione di proteine ​​fluorescenti su un microscopio confocale a scansione laser. Si descrivono le modalità per la fotoconversione di campioni di proteine ​​puried, nonché per evidenziare ottici a doppia sonda in cellule vive con mOrange2 e Dronpa.

Tags

PhotoconversionFluorescent ProteinsOptical HighlighterLive CellsMarkingSubpopulationTrackingIntensityExposure TimePhotoconversion LightPhotobleachConfocal Laser Scanning MicroscopePurified Protein Droplet SamplesPhotophysical BehaviorMicroscope ConfigurationDual-probe Optical HighlightingMOrange2Dronpa

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