마우스에서 온전한 난소 채취: 쥐 모델에서 완전한 난소를 분리하는 수술 절차

수술 플랫폼에서 오른쪽 측면 위치에 있는 마취된 암컷 마우스로 시작합니다. 다음으로 쥐의 복부를 면도하고 해당 부위를 소독합니다. 주요추 피부 절개를 하고 복부 근육을 해부하여 복강을 노출시킵니다.

이제 난소 지방 패드 중 하나인 난소를 둘러싼 지방 조직을 찾습니다. 난관은 난소를 자궁 뿔이라고 하는 긴 관형 구조에 연결합니다. 또한, 난소 지방 패드와 함께 난소를 부드럽게 외부로 밀어내고 젖은 거즈 위에 올려 조직의 수분을 유지합니다.

이제 난소와 난관 끝을 감싸는 얇은 막인 난소 활액낭을 식별하십시오. 난소와 난소 인대 사이의 경계를 형성하는 난소 문 반대편 활액낭을 절개합니다. 난소 인대는 구조적으로 난소와 자궁 뿔을 연결합니다.

난소를 노출시킨 후 난소 활액낭에서 부드럽게 제거하고 난소 문을 조여 난소를 절제합니다. 절제된 난소를 차갑게 식염수가 들어 있는 배양 플레이트로 옮깁니다.

기능 단위로 구성된 온전한 마우스 난소(각각 난모세포를 포함하는 난포)를 추가 사용할 때까지 보관하십시오.

시술을 시작하기 전에 발가락을 꼬집어 적절한 진정 수준을 확인하고 동물의 눈에 연고를 바르십시오. 달궈진 종이 타월 더미 위에 마우스를 바로 누운 자세로 놓고 갈비뼈 바로 아래에서 시작하여 말단부로 이동하면서 40번 블레이드 이발기를 사용하여 동물의 양쪽 정중선에서 몇 밀리미터 옆으로 2-3센티미터 정사각형의 머리카락을 제거하고 정중선을 덮는 1-2 2센티미터의 머리카락 스트립을 제거합니다.

진통제를 투여한 후 동물을 누운 자세로 가열된 멸균 수술 부위로 옮기고 2 x 2cm 크기의 에탄올 적신 70% 거즈를 사용한 다음 베타딘 스크럽을 사용하여 수술 부위를 소독합니다. 그런 다음 수술 부위 중 하나에 1-1.5cm 주둔추 절개를 하고 두 개의 가위로 밑에 있는 근막에서 피부를 무딘 식부

그런 다음 근막을 통해 또 다른 절개를 하고 복강에 도달할 때까지 가능한 한 표면적으로 근막 아래를 측면으로 무딘 해부합니다. 절개 부위 위에 2 x 2cm 크기의 거즈 수술용 드레이프를 놓고 멸균 식염수로 거즈를 적십니다.

작은 집게를 사용하여 난소를 둘러싸고 있는 지방 조직을 찾아 지방 패드와 난소를 드레이프 위로 부드럽게 추출합니다. 난소 지방 패드는 주변 지방 조직보다 더 하얗게 보입니다. 1.5인치 불독 클램프를 지방 패드에 놓고 난소 활액낭을 막지 않도록 주의하고 시술 중에 관을 제자리에 고정합니다.

해부 현미경을 사용하여 난소 활액낭을 식별하십시오. 그런 다음 두 개의 시계 집게로 활액낭을 잡고 난소 문 반대쪽의 활액낭을 절개하여 난소를 노출시킵니다.

활액낭을 찢어버릴 위치를 결정하기 전에 봉합하기 전에 새 난소를 배치할 활액낭의 주머니를 시각화하십시오. 내인성 난소를 제거하는 데 필요한 만큼만 활액낭을 엽니다.

활액낭에서 난소를 부드럽게 제거하고 시계 제작자 겸자로 난소 문을 고정하여 난소를 절제하고 출혈을 방지합니다. 그런 다음 기증자 난소를 섭씨 4도의 멸균 식염수가 들어 있는 시계 유리에 넣고 유리 위에 느슨한 덮개를 씌웁니다.