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El aislamiento de los ribosomas traducir contienen peptidil-ARNt para el Análisis Funcional y Estructural
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Isolation of Translating Ribosomes Containing Peptidyl-tRNAs for Functional and Structural Analyses
DOI:

11:19 min

February 25, 2011

, , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:59Preparation of Cell Free Extracts Depleted of RF2
  • 04:28Preparation of a DNA Template
  • 05:18Preparation of Biotin Labeled mRNA
  • 06:19Isolation of Translating Ribosomes Containing a Peptidyl-tRNA
  • 07:56Analysis of the Isolated Ribosomes Containing the Peptidyl-tRNA
  • 09:23Representative Results
  • 10:52Conclusion

Summary

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Un obstáculo importante para los análisis bioquímicos de los ribosomas que contienen naciente peptidil-ARNt ha sido la presencia de los ribosomas otros en las mismas muestras, los ribosomas no participan en la traducción de la secuencia del ARNm específico que se analiza. Hemos desarrollado una metodología sencilla para purificar, exclusivamente, los ribosomas que contiene la naciente peptidil-tRNA de interés.

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