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Automatisé d'interaction hydrophobe Chromatographie sur colonne de sélection pour l'utilisation dans la purification des protéines
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Automated Hydrophobic Interaction Chromatography Column Selection for Use in Protein Purification
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Automatisé d'interaction hydrophobe Chromatographie sur colonne de sélection pour l'utilisation dans la purification des protéines

DOI:
10.3791/3060-v

•

10:21 min

•

September 21, 2011

•

, ,
1College of Nursing, Interdisciplinary Life Sciences Research Laboratory,Seattle University, 2College of Science and Engineering, Interdisciplinary Life Sciences Research Laboratory,Seattle University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:30Buffer and Sample Preparation
  • 02:48Physical Setup and Plumbing of the DuoFlow Chromatography System
  • 04:11Priming System Lines,Programming Run Method, and Equilibrating HIC Columns
  • 05:43Sample Loading, Programming the Software, and Running the Column Scouting Protocol
  • 07:36Representative Chromatogram and Fluorescent Fraction Data
  • 09:23Conclusion

Summary

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Procédé automatisé pour identifier appropriés chromatographie d'interaction hydrophobe (HIC) médias à être utilisés dans le procédé de purification de protéine est présenté. La méthode utilise un système de moyenne pression chromatographie en phase liquide, y compris buffer blending automatisé, dynamique boucle d'injection de l'échantillon, sélection de la colonne séquentielle, multi-longueur d'onde d'analyse et de collecte de l'éluat scission fraction.

Tags

Automated Hydrophobic Interaction ChromatographyProtein PurificationChromatographic Medium SelectionScoutingHydrophobicityAffinity ChromatographyIon Exchange ChromatographyProtein ConcentrationAmmonium SulfatePurification MethodNonpolar LigandChromatography ColumnSalt Concentration

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