This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 01:16Making Carbon Coated EM Grids for Negative Staining EM
- 02:28Carbon Coating Grids
- 04:27Preparing Negative Stain EM Grids
- 05:57Preparing an Electron Microscope
- 07:07Electron Microscopy Images
- 07:30Conclusion
דגימות חלבון חזותי על ידי מיקרוסקופית אלקטרונים שלילי כתם (EM) הפך פופולרי שיטת ניתוח מבניות. זה שימושי עבור ניתוח מבניות כמותיים, כגון חישוב שחזור 3D של מולקולות הנלמד, וגם לבחינה איכותית של איכות ההכנות חלבון. במאמר זה אנו מציגים פרוטוקולים מפורטים להכנת רשתות EM, מכתים את המדגם באופן חזותי את המדגם אלקטרון במיקרוסקופ. משתמשי המחשב השני יכול לעקוב אחר הפרוטוקולים הללו בקלות לנצל שלילי כתם EM כמו assay שגרתי, בנוסף מבחני ביוכימיים אחרים, להערכת דגימות חלבון שלהם.
Tags
VisualizingProteinsMacromolecular ComplexesNegative Stain EMGrid PreparationImage AcquisitionSingle Particle Electron MicroscopyStructural BiologyProtein StructuresCryoEMSample Preparation MethodDried Heavy Metal SaltSpecimen ContrastNegative Stain EMThree-dimensional StructurePurified ProteinsProtein ComplexesHomogeneity/heterogeneityLarge AssembliesQuality EvaluationEM ProtocolCarbon Coated GridsElectron Microscope
