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नकारात्मक दाग EM द्वारा प्रोटीन और macromolecular परिसर Visualizing: ग्रिड तैयारी से छवि अधिग्रहण के लिए
JoVE 신문
생체공학
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JoVE 신문 생체공학
Visualizing Proteins and Macromolecular Complexes by Negative Stain EM: from Grid Preparation to Image Acquisition
DOI:

08:01 min

December 22, 2011

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:16Making Carbon Coated EM Grids for Negative Staining EM
  • 02:28Carbon Coating Grids
  • 04:27Preparing Negative Stain EM Grids
  • 05:57Preparing an Electron Microscope
  • 07:07Electron Microscopy Images
  • 07:30Conclusion

Summary

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नकारात्मक दाग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (EM) द्वारा Visualizing प्रोटीन के नमूने एक लोकप्रिय संरचनात्मक विश्लेषण पद्धति बन गया है. यह मात्रात्मक संरचनात्मक विश्लेषण के लिए उपयोगी है, जैसे अध्ययन किया जा रहा है अणुओं के एक 3D पुनर्निर्माण की गणना, और भी प्रोटीन की तैयारी की गुणवत्ता के गुणात्मक परीक्षा के लिए. इस अनुच्छेद में हम EM ग्रिड की तैयारी, नमूना धुंधला हो जाना और एक इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप में नमूना visualizing के लिए विस्तृत प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं. नौसिखिया उपयोगकर्ताओं के इन प्रोटोकॉल का पालन करें और आसानी से उपयोग करने के लिए नकारात्मक EM एक नियमित परख के रूप में दाग, अन्य जैव रासायनिक assays के लिए इसके अलावा में अपने प्रोटीन के नमूने का मूल्यांकन करने के लिए कर सकते हैं.

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