Visualisere Proteiner og makromolekylær komplekser ved Negative Stain EM: fra Grid Forberedelse til Image Acquisition

Visualisering protein prøver av negative stain elektronmikroskopi (EM) har blitt et populært strukturell analysemetode. Det er nyttig for kvantitativ strukturell analyse, for eksempel beregne en 3D-rekonstruksjon av molekyler som studeres, og også for kvalitativ undersøkelse av kvaliteten på protein preparater. I denne artikkelen presenterer vi detaljerte protokoller for å forberede EM nett, flekker prøven og visualisere prøven i et elektronmikroskop. Uerfarne brukere kan følge disse protokollene og enkelt å bruke negative beis EM som en rutinemessig analyse, i tillegg til andre biokjemiske analyser, for å vurdere deres protein prøver.