This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 01:16Making Carbon Coated EM Grids for Negative Staining EM
- 02:28Carbon Coating Grids
- 04:27Preparing Negative Stain EM Grids
- 05:57Preparing an Electron Microscope
- 07:07Electron Microscopy Images
- 07:30Conclusion
Visualisering protein prover av negativa bets elektronmikroskopi (EM) har blivit en populär strukturell analys metod. Det är användbart för kvantitativ strukturell analys, såsom att beräkna en 3D-rekonstruktion av molekyler som studeras, och även för kvalitativ undersökning av kvaliteten på proteinet förberedelser. I denna artikel presenterar vi detaljerade protokoll för att förbereda EM nät, färgning provet och visualisera provet i ett elektronmikroskop. Nybörjare kan följa dessa protokoll lätt och att använda negativa fläcken EM som rutin analys, utöver andra biokemiska analyser för att utvärdera deras protein prover.
Tags
VisualizingProteinsMacromolecular ComplexesNegative Stain EMGrid PreparationImage AcquisitionSingle Particle Electron MicroscopyStructural BiologyProtein StructuresCryoEMSample Preparation MethodDried Heavy Metal SaltSpecimen ContrastNegative Stain EMThree-dimensional StructurePurified ProteinsProtein ComplexesHomogeneity/heterogeneityLarge AssembliesQuality EvaluationEM ProtocolCarbon Coated GridsElectron Microscope
