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Determinação da Raft Lipid Particionamento de Sondas marcadas com fluorescência em células vivas por Espectroscopia de Correlação de Fluorescência (FCS)
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Determination of Lipid Raft Partitioning of Fluorescently-tagged Probes in Living Cells by Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS)

Determinação da Raft Lipid Particionamento de Sondas marcadas com fluorescência em células vivas por Espectroscopia de Correlação de Fluorescência (FCS)

DOI:
10.3791/3513-v

•

10:59 min

•

April 06, 2012

•

, ,
1Centre de Recherche de l’Institut du Cerveau et de la Moelle Épinière,Hôpital de la Pitié-Salpêtrière, 2Institut des Sciences Moléculaires d’Orsay,Université Paris-Sud, 3Centre de Photonique Biomédicale du Centre Laser,Université Paris-Sud

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:48Calibration of the FCS Setup
  • 03:45FCS Data Analysis
  • 05:50Staining of Living Cells with Lipid-rafts Marker
  • 06:51FCS Data Acquisition on Living Cells
  • 08:07Representative FCS Analysis
  • 10:18Conclusion

Summary

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Uma técnica para sondar o particionamento jangada lipídico de proteínas fluorescentes na membrana plasmática de células vivas é descrito. Leva vantagem da disparidade em tempos de difusão de proteínas localizadas dentro ou fora de jangadas lipídicas. A aquisição pode ser realizada de forma dinâmica em condições de controlo ou após a adição da droga.

Tags

Lipid Raft PartitioningFluorescently-tagged ProbesLiving CellsFluorescence Correlation SpectroscopyCell MembranesMicrodomainsCholesterolSphingolipidsSignallingTraffickingDiseasesControversyLipid Raft SizeMicroscopy Resolution LimitDirect ImagingTechniquesDetergent Resistant MembranesCo-patching With AntibodiesArtefactsSensitive AnalysisPlasma Membrane

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