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Chapters
- 00:05Title
- 01:30Transfection
- 02:20Cell Lysis
- 03:30Binding to Rabbit IgG-agarose
- 04:53TEV Protease Cleavage
- 05:48Binding to Immobilized Streptavidin Beads
- 07:50Biotin Elution of the Streptavidin Binging Peptide and Bait Protein
Tandem Affinitätsreinigung ist ein robustes Verfahren zur Identifizierung von Protein Bindungspartner. Als Proof of Concept wurde die Methode auch auf die gut charakterisierte Translationsinitiationsfaktors eIF4E zu Copräzipitat der Wirtszelle Faktoren in Initiation der Translation beteiligt angewendet. Dieses Verfahren ist einfach einem der zellulären oder viralen Proteins.
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Protein Interacting PartnersTandem Affinity PurificationIdentification Of Interacting ProteinsYeast Two Hybrid SystemPull Down AssaysImmunoprecipitationMass Spectrometry IdentificationDouble-affinity Tag Mediated PurificationTAPEukaryotic Translation Initiation Factor EIF4ECellular Translation Factor EIF4EEIF4F ComplexCap-dependent Translation InitiationProtein G UnitsStreptavidin Binding PeptideTobacco Etch Virus (TEV) Protease Cleavage Sequence
