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Räumlich-zeitliche Manipulation kleiner GTPase-Aktivität in subzellulären Ebene und auf Zeitskala von Sekunden in lebenden Zellen
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JoVE 신문 생체공학
Spatio-Temporal Manipulation of Small GTPase Activity at Subcellular Level and on Timescale of Seconds in Living Cells
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Räumlich-zeitliche Manipulation kleiner GTPase-Aktivität in subzellulären Ebene und auf Zeitskala von Sekunden in lebenden Zellen

DOI:
10.3791/3794-v

•

10:27 min

•

March 09, 2012

•

, , , , , ,
1Department of Cell Biology, Center for Cell Dynamics,Johns Hopkins University, 2Graduate School of Pharmaceutical Sciences,University of Tokyo, 3Biomedical Engineering,Johns Hopkins University

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:17Transfection of Plasmid DNA
  • 04:02Preparation of cRb-A Solution
  • 05:22Microscopy and Light Illumination at the Subcellular Level
  • 07:07Examining the Effect of RAC Activation on Local Ruffle Formation
  • 09:29Conclusion

Summary

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Verfahren zum räumlichen-zeitlichen Steuerung der GTPase-Aktivität durch Licht beschrieben. Dieses Verfahren basiert auf Rapamycin-FKBP-induzierte FRB Heterodimerisierung und Foto einschließende Systeme. Optimierung der Licht-Bestrahlung ermöglicht die raum-zeitlich kontrollierte Aktivierung der kleinen GTPasen auf subzellulärer Ebene.

Tags

Spatio-temporal ManipulationSmall GTPase ActivitySubcellular LevelSecondsLiving CellsDynamic RegulationRho FamilyGuanosine TriphosphatasesCellular FunctionsVisualizationReal TimePerturbationProtein ActivitiesSubcellular LocationTimingLight-induced ActivationRapamycin-induced FKBP-FRB HeterodimerizationPhoto-caging MethodRapamycinRapid Inducible ActivationInactivationTranslocationPlasma MembraneFRB AnchorPhoto-caging SystemRapamycin Analogs

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