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Détection des bactéries à l'aide ADNzymes fluorogènes
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Detection of Bacteria Using Fluorogenic DNAzymes
DOI:

13:20 min

May 28, 2012

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:02Construction of RFD-EC1 and RFSS1 by Template Mediated Enzymatic Ligation
  • 04:38Detection using Fluorescence Spectrophotometer
  • 06:28Detection by Gel Electrophoresis
  • 08:04Single Cell Detection
  • 09:55Experimental Validation using E. coli Crude Extracellular Mixtures
  • 12:42Conclusion

Summary

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Nous avons récemment rapporté une nouvelle approche pour générer des sondes DNAzyme fluorogènes qui peuvent être appliqués à mettre en place un simple, «mix-and-lire" immunofluorescence pour la détection bactérienne. Ces sondes d'ADN spécifiques catalyser le clivage d'un chromophore de modification d'ADN-ARN substrat chimérique en présence d'un mélange brut extracellulaire (LEC) produite par une bactérie spécifique, traduisant ainsi la détection de bactéries dans la génération du signal de fluorescence. Dans ce rapport, nous allons décrire les principaux procédures expérimentales où une sonde DNAzyme spécifique notée "RFD-EC1" est employé pour la détection de la bactérie modèle,<em> Escherichia coli (E. coli)</em>.

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