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La detección de bacterias mediante ADNzimas fluorogénicos
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Detection of Bacteria Using Fluorogenic DNAzymes
DOI:

13:20 min

May 28, 2012

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:02Construction of RFD-EC1 and RFSS1 by Template Mediated Enzymatic Ligation
  • 04:38Detection using Fluorescence Spectrophotometer
  • 06:28Detection by Gel Electrophoresis
  • 08:04Single Cell Detection
  • 09:55Experimental Validation using E. coli Crude Extracellular Mixtures
  • 12:42Conclusion

Summary

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Recientemente hemos informado de un nuevo enfoque para la generación de sondas fluorogénicos DNAzyme que se pueden aplicar para crear un simple, "mezclar y leer" ensayo de inmunofluorescencia para la detección de bacterias. Estas sondas de ADN especiales catalizar la escisión de un cromóforo modificado con ADN-ARN sustrato quimérico en la presencia de la mezcla bruta extracelular (CEM), producida por una bacteria específica, con lo que la traducción de detección de bacterias en la generación de señales de fluorescencia. En este informe se describen los principales procedimientos experimentales que se emplea una sonda DNAzyme específica denominada "RFD-EC1" para la detección de la bacteria modelo,<em> Escherichia coli (E. coli)</em>.

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