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Plus rapide, à haute résolution, la MTPA-GFP basée sur Fusion test mitochondrial l'acquisition de données cinétiques de plusieurs cellules en parallèle en utilisant la microscopie confocale
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
A Faster, High Resolution, mtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion Assay Acquiring Kinetic Data of Multiple Cells in Parallel Using Confocal Microscopy
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Plus rapide, à haute résolution, la MTPA-GFP basée sur Fusion test mitochondrial l'acquisition de données cinétiques de plusieurs cellules en parallèle en utilisant la microscopie confocale

DOI:
10.3791/3991-v

•

10:45 min

•

July 20, 2012

•

, , , ,
1Department of Neuroscience, Center for Neuroscience Research,Tufts School of Medicine, 2Department of Internal Medicine, Geriatrics & Gerontology,Wake Forest Baptist Medical Center, 3Department of Medicine,Boston University Medical Center

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:33Imaging Plate Preparation
  • 02:29Imaging Parameters for the Zeiss LSM 710 Confocal Microscope
  • 03:37Optimizing the Imaging Parameters
  • 04:49Mitochondrial-fusion Assay Set-up
  • 07:36Analyzing the PA-GFP Signal Intensity
  • 08:17Results: Representative Mitochondrial-fusion Assays
  • 09:49Conclusion

Summary

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De fusion mitochondriale a été mesurée par le suivi de l'équilibrage de photoconverted matrice ciblée GFP à travers le réseau mitochondrial au cours du temps. Jusqu'à présent, une seule cellule pourrait être soumis à une analyse cinétique à long heure à une heure. Nous présentons une méthode qui permet de mesurer simultanément plusieurs cellules, ce qui accélère le processus de collecte de données.

Tags

FasterHigh ResolutionMtPA-GFP-based Mitochondrial Fusion AssayKinetic DataMultiple CellsParallelConfocal MicroscopyFusion ActivityPhoto-conversionPhotoactivatable GFP (mtPAGFP)EquilibrationLiving CellsTime Lapse ApproachScale UpAutomateLow Concentration Of TMRESignal IntensityPAGFP Expressing CellsSubcellular QuantificationCytoarchitectural Environment

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