Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Sujata S. Jha; Anton A. Komar

doi:10.3791/4026

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Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes In vitro Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes In vitro Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA

DOI:

10.3791/4026-v

•

10:15 min

•

July 06, 2012

•

Sujata S. Jha, Anton A. Komar

¹Center for Gene Regulation in Health and Disease, Department of Biological, Geological and Environmental Sciences,Cleveland State University

Chapters

00:05Title
03:55DNA Template Preparation, In vitro Transcription, and In vitro Translation
05:30Isolation and Resolution of Nascent Polypeptides
06:54Representative Translational Pause Results
08:35Conclusion

Summary

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Uma técnica para identificar locais de pausa de translação sobre mRNA é descrito. Este procedimento é baseado no isolamento de polipéptidos nascentes que se acumulam nos ribossomas durante in vitro tradução de um ARNm alvo, seguido de análise de tamanho das cadeias nascentes utilizando uma electroforese em gel de desnaturação.

Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes<em> In vitro</em> Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA

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