Journal
/
/
Ett protokoll för identifiering av protein-proteininteraktioner Baserat på<sup> 15</sup> N metabolisk märkning, immunoutfällning, kvantitativa masspektrometri och Affinity modulering
JoVE 신문
생물학
This content is Free Access.
JoVE 신문 생물학
A Protocol for the Identification of Protein-protein Interactions Based on 15N Metabolic Labeling, Immunoprecipitation, Quantitative Mass Spectrometry and Affinity Modulation
DOI:

14:44 min

September 24, 2012

, , , , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:30Cell Lysis, Crosslinking and Sample Preparation
  • 05:22Immunoprecipitation
  • 07:06Sample Preparation for nano-LC-MS/MS
  • 10:50Results: HSP70B with its Nucleotide Exchange Factor CGE1
  • 14:07Conclusion

Summary

자동 번역

Vi presenterar en variation av QUICK (Quantitative Immunoprecipitation kombination med Knockdown) strategi som infördes tidigare att skilja mellan sanna och falska protein-protein interaktioner. Vår strategi bygger på<sup> 15N</sup> Metabolisk märkning, modulering av affiniteter av protein-protein-interaktioner genom närvaron / frånvaron av ATP, immunprecipitation och kvantitativ masspektrometri.

Related Videos

Read Article