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Chapters
- 00:05Title
- 01:37CRISPR/Cas System Overview
- 02:29Generation of Long Pre-crRNA Substrates via PCR
- 04:14Generation of Intermediate Pre-cdRNA Substrates via Annealing of DNA Oligonucleotides
- 06:10Generation of Short Cas RNA Substrates via Custom RNA Oligonucleotide Synthesis
- 06:41In vitro T7 RNA Polymerase Transcription
- 08:04Cas6 Endonuclease Assay
- 09:08Results: Representative Cas6 Endonuclease Assay
- 11:10Conclusion
CRISPR / कैस बैक्टीरिया और archaea में प्रणालियों मध्यस्थता प्रतिरक्षा अनुकूली. कई कैस प्रोटीन करने के लिए लंबाई बदलती के crRNA व्यापारियों पर अभिनय endoribonucleases के रूप में कार्य करने का प्रस्ताव कर रहे हैं. यहाँ हम तीन अलग अलग दृष्टिकोण का वर्णन करने के लिए कैस endonuclease गतिविधि के जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए पूर्व crRNA substrates उत्पन्न.
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Substrate GenerationEndonucleasesCRISPR/Cas SystemsVirusesProkaryotic HostsBacterial EvolutionArchaeal LifeRestriction ModificationAbortive InfectionAdaptive Immune SystemsCRISPR SequencesCas GenesCas ProteinsSpacer ElementCRISPR ClusterPrecursor-crRNACas6 FamilyCrRNAsViral DNA UptakeCascade ComplexBase ComplementarityNuclease Cas3Invader DNA Destruction
