CRISPR / 카스 시스템의 Endonucleases을위한 기판 생성

DOI:

10.3791/4277-v

•

11:53 min

•

September 08, 2012

•

Judith Zoephel, Srivatsa Dwarakanath, Hagen Richter, André Plagens, Lennart Randau

¹Prokaryotic Small RNA Biology,Max-Planck-Institute for Terrestrial Microbiology

Chapters

00:05Title
01:37CRISPR/Cas System Overview
02:29Generation of Long Pre-crRNA Substrates via PCR
04:14Generation of Intermediate Pre-cdRNA Substrates via Annealing of DNA Oligonucleotides
06:10Generation of Short Cas RNA Substrates via Custom RNA Oligonucleotide Synthesis
06:41In vitro T7 RNA Polymerase Transcription
08:04Cas6 Endonuclease Assay
09:08Results: Representative Cas6 Endonuclease Assay
11:10Conclusion

Summary

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박테리아와 Archaea의 CRISPR / 카스 시스템 중재 적응 면역. 많은 카스 단백질은 길이를 변화의 crRNA의 전구체에 작용 endoribonucleases 역할을 제안하고 있습니다. 여기 카스의 endonuclease 활동의 생화학 분석을위한 사전 crRNA 기판을 생성하는 세 가지 방법을 설명합니다.

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