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Quantitative à haut débit Test de cytotoxicité cellulaire unique pour les cellules T
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells
DOI:

09:28 min

February 02, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:32Fabrication of Arrays of Nanowells in PDMS
  • 02:14Target Cell (T) Labeling
  • 02:53Effector (E) Cell Labeling
  • 03:26Separation of Live and Dead Cells by Ficoll Density Gradient
  • 05:23Cell Loading onto Nanowell Array
  • 06:51Imaging
  • 07:58Results: A High-throughput Cytolytic Assay
  • 09:03Conclusion

Summary

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Nous décrivons une cellule unique à haut débit essai pour mesurer la cytotoxicité des lymphocytes T lorsqu'ils sont incubés avec les cellules cibles tumorales. Ce procédé utilise une matrice élastomère dense, de puits sous-nanolitres (~ 100.000 puits / matrice) à l'espace confiner les cellules T et les cellules cibles à des rapports définis et est couplée à la microscopie par fluorescence pour surveiller effecteur-cible conjugaison et l'apoptose subséquente.

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