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La production de disulfure stabilisées complexes peptide transmembranaire pour des études structurales
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies
DOI:

12:05 min

March 06, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
  • 03:55On-column Oxidative Crosslinking
  • 04:50TFA Elution and Quantitation
  • 05:52CNBr Digestion
  • 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
  • 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
  • 11:19Conclusion

Summary

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Les études biophysiques et biochimiques des interactions entre les domaines de la protéine membranaire embarqués face à de nombreux défis techniques, dont le premier est l'obtention de matériel d'étude approprié. Cet article décrit un protocole de production et de purification du disulfure stabilisées complexes peptide transmembranaire qui sont appropriés pour l'analyse structurale par une solution de résonance magnétique nucléaire (RMN) et d'autres applications analytiques.

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