JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Title
- 01:43Preparation of Cell Lysate
- 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
- 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
- 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
- 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
- 09:40Conclusion
Mikroskala Thermophoresis (MST) kan bli mye brukt til fastsettelse av bindende affinitet uten rensing av målet protein fra cellelysater. Protokollen omfatter overekspresjon av GFP-sammensmeltet protein, cellelyse i ikke-denaturerende betingelser, og påvisning av MST-signal i nærvær av varierende konsentrasjoner av ligand.
