Journal
/
생물학
/
Очистки белков-Free метод привязки Определение Affinity по Микромасштабные Термофорез
JoVE 신문
생물학
JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다.  전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
JoVE 신문 생물학
Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Очистки белков-Free метод привязки Определение Affinity по Микромасштабные Термофорез

DOI:
10.3791/50541-v

•

10:22 min

•

August 15, 2013

•

, , , , , ,
1Cancer and Inflammation Program,National Cancer Institute, 2Basic Science Program,SAIC-Frederick, Inc., 3Departments of Oncology and Radiation Medicine,Georgetown University Medical Center, 4Structural Biophysics Laboratory,National Cancer Institute

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:43Preparation of Cell Lysate
  • 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
  • 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
  • 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
  • 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
  • 09:40Conclusion

Summary

자동 번역

자동 번역

Микромасштабные термофореза (MST) могут быть широко использованы для определения аффинности связывания без очистки целевого белка из клеточных лизатов. Протокол включает сверхэкспрессии GFP-слитый белок, лизис клеток в неденатурирующих условиях, и обнаружение MST сигнала в присутствии различных концентраций лиганда.

Tags

Protein PurificationMicroscale ThermophoresisBinding AffinityKD DeterminationGFP-fused ProteinSTAT3Cell LysateNon-denaturing ConditionsDrug DiscoveryProtein Interactions

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Related Videos

check_url/kr/50541?article_type=v

Важность правильной концентрации белка для кинетики и Affinity Определение в структурно-функционального анализа
check_url/kr/50541?article_type=v

Выделение лабильной Multi-белковые комплексы по В естественных условиях Контролируемые Сотовая сшивания и иммуно-магнитного аффинной хроматографии
check_url/kr/50541?article_type=v

PAR-Clip - метод идентификации транскриптома всей места связывания РНК-связывающие белки
check_url/kr/50541?article_type=v

Липидов везикул-опосредованной аффинной хроматографии с использованием магнитных Активированный сортировки клеток (LIMACS): новый метод для анализа Белково-липидные взаимодействия
check_url/kr/50541?article_type=v

Ортогональные очистки белков Ведущий: Малый Биспецифичные тегов Affinity
check_url/kr/50541?article_type=v

Идентификация белка взаимодействие партнеров, используя тандем аффинной очистки
check_url/kr/50541?article_type=v

В режиме реального времени Анализы транспорта ретинола на мембранный рецептор плазменных Retinol Binding Protein
check_url/kr/50541?article_type=v

Протокол для фагов и Affinity выделение с помощью рекомбинантного белка Приманки
check_url/kr/50541?article_type=v

Чувствительностью и специфичностью Количественный метод определения Сыворотка Сердечная Миозина связывающий белок-C по электрохемилюминесценцию иммуноферментного
check_url/kr/50541?article_type=v

Определение белок-белковых взаимодействие в<em> Дрозофилы</em> Взрослые Главы по Tandem аффинной очистки (TAP)

Read Article