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Matrix-assisted laser di desorbimento / ionizzazione Time of Flight (MALDI-TOF) Massa spettrometrica Analisi delle proteine ​​intatte grande di 100 kDa
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight (MALDI-TOF) Mass Spectrometric Analysis of Intact Proteins Larger than 100 kDa
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Matrix-assisted laser di desorbimento / ionizzazione Time of Flight (MALDI-TOF) Massa spettrometrica Analisi delle proteine ​​intatte grande di 100 kDa

DOI:
10.3791/50635-v

•

07:49 min

•

September 09, 2013

•

,
1Institute of Structural Biology “J.P. Ebel”, UMR5075, Commissariat à L’Energie Atomique et aux Energies Alternatives (CEA), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS),Université J. Fourier

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09Recrystallization of Matrices in order to Improve Their Purity (Optional)
  • 02:06Cleaning of MALDI Stainless Steel Target
  • 02:49&#945-CHCA Thin Layer Solution: Preparation and Deposition on the MALDI Target
  • 03:18Preparation of Matrix Solutions: &#945-CHCA, DHB, and CHCA_DHB Mixture
  • 04:04Sample Deposition on the MALDI Target and MALDI Spectra Acquisition
  • 05:17Results: MALDI-TOF Analysis of Proteins Larger than 100 kDa
  • 07:08Conclusion

Summary

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Misura della massa accurata rappresenta un passo importante nel corso dell'inchiesta di proteine. Matrix-assisted laser desorbimento / ionizzazione (MALDI) spettrometria di massa (MS) può essere utilizzato per tale determinazione e il suo vantaggio chiave è la tolleranza di sali, detergenti e contaminanti. Qui illustriamo un approccio accessibili per l'analisi di proteine ​​più grandi di 100 kDa tramite MALDI-MS.

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Keywords: MALDI-TOFMass SpectrometryIntact ProteinsProtein AnalysisProtein CharacterizationLarge ProteinsProtein Mass DeterminationSample PreparationMatrixCalibrationLaser EnergyAcquisition Time

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