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Allo steady-state, Pre-steady-state, e Single-fatturato di misura cinetica per il DNA Glycosylase Activity
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JoVE 신문 화학
Steady-state, Pre-steady-state, and Single-turnover Kinetic Measurement for DNA Glycosylase Activity
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Allo steady-state, Pre-steady-state, e Single-fatturato di misura cinetica per il DNA Glycosylase Activity

DOI:
10.3791/50695-v

•

14:27 min

•

August 19, 2013

•

, , ,
1Laboratory of Structural Biology,NIEHS, National Institutes of Health

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:55Sample Preparation and Measurement of Steady-state Time Course and Active Site Titration of OGG1
  • 05:53Measurement of Pre-steady-state Time Course
  • 10:56Single-turnover Time Course
  • 11:50Results: Kinetic Measurements of DNA Glycosylase Activity
  • 14:01Conclusion

Summary

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Corsi a tempo per l'attività glicosilasi di 8-oxoguanine glicosilasi DNA sono bifasica esibendo una raffica di formazione del prodotto e una fase a regime lineare. Utilizzando tecniche di quench-flow, lo scoppio e le tariffe di stato stazionario possono essere misurati, che corrispondono ad escissione di 8-oxoguanine e rilascio della glicosilasi dal DNA prodotto, rispettivamente.

Tags

DNA GlycosylaseOGG18-oxoGSteady-state KineticsPre-steady-state KineticsSingle-turnover KineticsBurst KineticsProduct ReleaseEnzyme CatalysisDNA Lesion Excision

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