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Protokolle für die Implementierung einer<em> Escherichia coli</em> Basierend TX-TL Zellfreie Expression System für Synthetische Biologie
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Protocols for Implementing an Escherichia coli Based TX-TL Cell-Free Expression System for Synthetic Biology
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Protokolle für die Implementierung einer<em> Escherichia coli</em> Basierend TX-TL Zellfreie Expression System für Synthetische Biologie

DOI:
10.3791/50762-v

•

16:11 min

•

September 16, 2013

•

, , , , ,
1Department of Biology,California Institute of Technology, 2Department of Bioengineering,California Institute of Technology, 3Synthetic Biology Center, Department of Bioengineering,Massachusetts Institute of Technology, 4School of Physics and Astronomy,University of Minnesota

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:41Cell Lysis
  • 06:29Extract Clarification
  • 08:32Experimental Execution of a TX-TL Reaction
  • 10:40Results: Assessment of TX-TL Cell-free Expression System
  • 15:56Conclusion

Summary

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Das Fünf-Tage-Protokoll beschreibt alle Schritte, Geräte und Zusatzsoftware notwendig für die Schaffung und den Betrieb einer effizienten endogenen Escherichia coli basierten TX-TL zellfreien Expressionssystem von Grund auf neu. Mit Reagenzien, nimmt das Protokoll 8 Stunden oder weniger, um das Setup eine Reaktion, sammeln und Prozessdaten.

Tags

Cell-free Expression SystemEscherichia ColiTX-TLTranscription-translationSynthetic BiologyProtein ExpressionIn VitroEndogenousT7 RNA PolymeraseLac/tet RepressorsMRNA DegradationDNA DegradationBiomolecular Breadboard

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