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Protocolos para implementação de uma<em> Escherichia coli</em> Com base TX-TL Expression System-Free Cell para Biologia Sintética
JoVE 신문
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JoVE 신문 생물학
Protocols for Implementing an Escherichia coli Based TX-TL Cell-Free Expression System for Synthetic Biology

Protocolos para implementação de uma<em> Escherichia coli</em> Com base TX-TL Expression System-Free Cell para Biologia Sintética

DOI:
10.3791/50762-v

•

16:11 min

•

September 16, 2013

•

, , , , ,
1Department of Biology,California Institute of Technology, 2Department of Bioengineering,California Institute of Technology, 3Synthetic Biology Center, Department of Bioengineering,Massachusetts Institute of Technology, 4School of Physics and Astronomy,University of Minnesota

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:41Cell Lysis
  • 06:29Extract Clarification
  • 08:32Experimental Execution of a TX-TL Reaction
  • 10:40Results: Assessment of TX-TL Cell-free Expression System
  • 15:56Conclusion

Summary

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Este protocolo de cinco dias descreve todos os passos, equipamentos e software suplementar necessário para a criação e execução de um Escherichia coli endógena eficiente baseado TX-TL livre de células sistema de expressão a partir do zero. Com reagentes, o protocolo leva 8 horas ou menos para configurar uma reação, coletar e processar dados.

Tags

Cell-free Expression SystemEscherichia ColiTX-TLTranscription-translationSynthetic BiologyProtein ExpressionIn VitroEndogenousT7 RNA PolymeraseLac/tet RepressorsMRNA DegradationDNA DegradationBiomolecular Breadboard

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