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Membrana-COLUMNA: una herramienta bioquímica para identificar las interacciones proteína-proteína de Proteínas de la Membrana<em> En Vivo</em
JoVE 신문
생체공학
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JoVE 신문 생체공학
Membrane-SPINE: A Biochemical Tool to Identify Protein-protein Interactions of Membrane Proteins In Vivo
DOI:

10:53 min

November 07, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:29Fixation of Protein-protein Interactions by Formaldehyde Cross-linking in Living Cells
  • 04:07Purification of Strep-tagged Membrane Protein
  • 05:24Purification of Strep-tag Membrane Bait Protein and SDS-PAGE
  • 07:43Confirmation of Interaction Partners
  • 08:53Results: Membrane SPINE Analysis
  • 10:33Conclusion

Summary

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Un enfoque bioquímico se describe para identificar in vivo interacciones proteína-proteína (PPI) de proteínas de membrana. El método combina la reticulación de proteínas, purificación por afinidad y espectrometría de masas, y es adaptable a casi cualquier tipo de célula u organismo. Con este enfoque, incluso la identificación de los IBP transitorios se hace posible.

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