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High-throughput Citometria de Fluxo Ensaio Celular para detectar anticorpos em N-metil-D-aspartato ou dopamina-2 Receptor em Soro Humano
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High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

High-throughput Citometria de Fluxo Ensaio Celular para detectar anticorpos em N-metil-D-aspartato ou dopamina-2 Receptor em Soro Humano

DOI:
10.3791/50935-v

•

10:19 min

•

November 23, 2013

•

, , , , ,
1Institute for Neuroscience and Muscle Research, The Kids Research Institute at the Children’s Hospital at Westmead,The University of Sydney, 2Flow Cytometry Centre,Westmead Millennium Institute for Medical Research

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:37Subcloning Strategy: D2R or NMDAR into pIRES2-EGFP Vector
  • 02:20Transfection: Expression of Neuronal Antigen in HEK293 Cells
  • 04:15Flow Cytometry Cell-based Assay for Detection of Antibody to Surface Neuronal Antigens
  • 07:44Results: Detection/Analysis of Antibody Binding
  • 09:45Conclusion

Summary

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Ao longo dos últimos anos, os ensaios baseados em células vivas têm sido utilizados com sucesso para detectar anticorpos contra antigénios de superfície e de conformação. Aqui, descrevemos um método que utiliza o fluxo de alto rendimento citometria permitindo a análise de grandes grupos de pacientes. Detecção de novos anticorpos irá melhorar o diagnóstico e tratamento de distúrbios mediados pela imunes.

Tags

Keywords: High-throughput Flow CytometryCell-based AssayAntibodiesN-methyl-D-aspartate ReceptorDopamine-2 ReceptorHuman SerumAutoimmune CNS DiseasesNeurotransmissionEukaryotic CellsFluorochrome-conjugated Secondary AntibodiesQuantitativeHigh-throughput Sampler SystemAntigenic TargetsCentral Nervous SystemImmune-mediated Disorders

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