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अनुकूलित नकारात्मक धुंधला: इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा लघु और असममित प्रोटीन संरचना की जांच के लिए एक उच्च throughput प्रोटोकॉल
JoVE 신문
환경과학
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JoVE 신문 환경과학
Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy
DOI:

09:37 min

August 15, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:56Preparations
  • 03:42Optimized Negative Staining
  • 06:16EM-Grid Analysis
  • 07:18Examples of Optimized Negative Staining (OpNS)
  • 08:44Conclusion

Summary

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अधिक प्रोटीन की तुलना में आधे से इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप इमेजिंग और तीन आयामी पुनर्निर्माण दोनों के लिए चुनौती दे रहे हैं कि छोटे प्रोटीन (आणविक जन <200 केडीए) कर रहे हैं. अनुकूलित नकारात्मक धुंधला उच्च विपरीत और अपेक्षाकृत उच्च संकल्प (~ 1 एनएम) विभिन्न शारीरिक शर्तों के तहत छोटे असममित प्रोटीन या परिसरों की छवियों को प्राप्त करने के लिए एक मजबूत और उच्च throughput प्रोटोकॉल है.

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