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Análisis de las reacciones de procesamiento del ARN que utilizan teléfonos Free Systems: 3 'End división de pre-mRNA Sustratos<em> In vitro</em
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JoVE 신문 생물학
Analysis of RNA Processing Reactions Using Cell Free Systems: 3′ End Cleavage of Pre-mRNA Substrates in vitro
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Análisis de las reacciones de procesamiento del ARN que utilizan teléfonos Free Systems: 3 'End división de pre-mRNA Sustratos<em> In vitro</em

DOI:
10.3791/51309-v

•

09:16 min

•

May 03, 2014

•

, , ,
1Department of Infectious Diseases,The Scripps Research Institute, 2Department of Chemistry,City College of New York

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:11Collecting Nuclear Extract
  • 04:09Probe Preparation and PAGE Extraction
  • 05:293′ mRNA Cleavage Reaction and PAGE Analysis
  • 08:04Cleavage Assay of RNA poly(A) for HIV-1
  • 08:44Conclusion

Summary

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ARN polimerasa II sintetiza un precursor de ARN que se extiende más allá del extremo 3 'del ARNm maduro. El final de la ARN maduro se genera cotranscriptionally, en un sitio de dictado por las secuencias de ARN, a través de la actividad de endonucleasa del complejo de escisión. Aquí, detalle el método para estudiar las reacciones de escisión in vitro.

Tags

RNA Processing3′ End CleavagePre-mRNACell-free SystemsIn VitroRNA Polymerase IIEndonuclease ActivityCleavage ComplexPolyadenylationNuclear ExtractsRadiolabeled RNA SubstratesHIV-1 MRNAs

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