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Quantitative Proteomics Mit reduktive Dimethylierung Stabile Isotope Labeling
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Quantitative Proteomics Using Reductive Dimethylation for Stable Isotope Labeling
DOI:

11:53 min

July 01, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:19Protein Purification and Alkylation of Free Sulfhydryl Groups
  • 02:59Protein Digestion, Reversed Phase Peptide Extraction, and Reductive Dimethylation Labeling
  • 06:02Basic pH Reversed Phase Chromatography and STop and Go Extraction
  • 08:17Microcapillary LC-MS/MS and Peptide Quantification
  • 09:58Results: Accuracy, Precision, and Reproducibility of ReDi Labeling
  • 11:24Conclusion

Summary

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Stabile Isotopenmarkierung von Peptiden durch reduktive Dimethylierung (Redi-Markierung) ist eine schnelle, kostengünstige Strategie für genaue Massenspektrometrie-basierte quantitative Proteomik. Hier zeigen wir ein robustes Verfahren für die Aufbereitung und Analyse von Proteingemischen mit Hilfe der redi Ansatz, der auf fast jedem Probentyp angewandt werden kann.

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