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Proteômica quantitativa utilizando redutora dimetilação para Stable Isotope Labeling
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Quantitative Proteomics Using Reductive Dimethylation for Stable Isotope Labeling
DOI:

11:53 min

July 01, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:19Protein Purification and Alkylation of Free Sulfhydryl Groups
  • 02:59Protein Digestion, Reversed Phase Peptide Extraction, and Reductive Dimethylation Labeling
  • 06:02Basic pH Reversed Phase Chromatography and STop and Go Extraction
  • 08:17Microcapillary LC-MS/MS and Peptide Quantification
  • 09:58Results: Accuracy, Precision, and Reproducibility of ReDi Labeling
  • 11:24Conclusion

Summary

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Rotulagem de isótopos estáveis ​​de peptídeos por dimetilação redutora (rotulagem Redi) é uma estratégia rápida e barata para proteômica precisos baseados em espectrometria de massa quantitativos. Aqui demonstramos um método robusto para a preparação e análise de misturas de proteínas, utilizando a abordagem de Redi que pode ser aplicado a quase todos os tipos de amostra.

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