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면역학 및 감염병학
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Un enzima di restrizione metodo basato clonazione per valutare l'<em> In vitro</em> Replica Capacità di HIV-1 Sottotipo C Gag-MJ4 chimerici virus
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses
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Un enzima di restrizione metodo basato clonazione per valutare l'<em> In vitro</em> Replica Capacità di HIV-1 Sottotipo C Gag-MJ4 chimerici virus

DOI:
10.3791/51506-v

•

14:23 min

•

August 31, 2014

•

, ,
1Emory Vaccine Center at Yerkes National Primate Research Center,Emory University, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,Emory University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:53Amplification of the HIV-1 Gag Gene from Infected, Frozen Plasma
  • 03:29Cloning Amplified Gag Genes into the MJ4, Subtype C, Infectious Molecular Clone
  • 06:09In vitro Replication of Gag-MJ4 Chimeras in GXR25 (CEM-CCR5-GFP) Cells
  • 10:06Analysis of Reverse Transcriptase in Cell Culture Supernatants
  • 12:11Results: A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses
  • 13:44Conclusion

Summary

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HIV-1 pathogenesis is defined by both viral characteristics and host genetic factors. Here we describe a robust method that allows for reproducible measurements to assess the impact of the gag gene sequence variation on the in vitro replication capacity of the virus.

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Keywords: HIV-1Subtype CGagReplication CapacityRestriction Enzyme CloningMJ4ZambiansCellular Immune PressureHLAViral LoadCD4+ T Cell Decline

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