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DNA-RNA combinado fluorescente<em> Em situ</em> A hibridização (FISH) para estudar inativação do cromossomo X em Diferenciada Feminino Rato Células-Tronco Embrionárias
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Combined DNA-RNA Fluorescent In situ Hybridization (FISH) to Study X Chromosome Inactivation in Differentiated Female Mouse Embryonic Stem Cells
DOI:

15:54 min

June 14, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 02:57Induction of Differentiation in Female Embryonic Stem Cells to Induce X Chromosome Inactivation
  • 04:55Fixation of Differentiated ES Cells for Subsequent DNA-RNA FISH Analysis
  • 05:33Labeling of DNA Probes for FISH Experiments
  • 08:02Permeabilization, Pre-treatment and Hybridization of Fixed Cells for Combined DNA-RNA FISH
  • 11:04Post-hybridization Washes and Antibody Mediated Detection of Probe
  • 13:21Results: X Chromosome Inactivation in Differentiating Female ES Cells is Visualized by Combined DNA-RNA FISH
  • 14:57Conclusion

Summary

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Hibridização in situ fluorescente (FISH), permite a detecção de ácidos nucleicos no seu ambiente nativo dentro das células. Nós aqui descrever um protocolo para o combinado, a detecção simultânea de RNA e DNA, por meio de FISH, que pode ser usado para estudar inativação do cromossomo X em células-tronco embrionárias.

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