This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 01:49Harvesting of SILAC-labeled Cell Lysates
- 03:39Binding Lysate to Anti-GFP Beads
- 04:45Preparation of Samples for MS Analysis
- 06:11Data Analysis I: Understanding the Results and Removal of Low-confidence Identifications
- 07:36Data Analysis II: Selecting High Confidence Interactions for Further Study
- 08:58Data Analysis III: Merging Replica Datasets
- 10:59Results: Identification of Translation Initiation Factor – Binding Proteins
- 12:22Conclusion
SILAC Immunutfällningsexperiment utgör ett kraftfullt medel för att upptäcka nytt protein: protein interaktioner. Genom att låta den exakta relativa kvantifiering av protein överflöd i både kontroll-och testprover, sanna växelverkan lätt kan skiljas från experimentella föroreningar, och låg affinitet interaktioner bevaras genom användning av mindre stränga buffertförhållanden.
