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Génération de<em> Enterobacter</em> Sp. UEE auxotrophes utilisant mutagénèse par transposon
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Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis
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Génération de<em> Enterobacter</em> Sp. UEE auxotrophes utilisant mutagénèse par transposon

DOI:
10.3791/51934-v

•

13:31 min

•

October 31, 2014

•

1Department of Biological Sciences, Center for Applied Chemical Biology,Youngstown State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:27Electroporation of Competent Cells
  • 04:35Gridding Transformants and Replica Plating to Determine the Auxotroph Phenotype
  • 08:02Gene Rescue
  • 11:13Results: Generation of Auxotrophic Transformants in Enterobacter sp. YSU
  • 12:39Conclusion

Summary

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Enterobacter sp. UEE grandit dans un milieu de sels glucose minimes. Les auxotrophes sont générées par le transformant avec un transposome qui se insère de manière aléatoire dans le génome de l'hôte. Les mutants sont trouvés par des répliques de milieu complexe à un milieu minimal. Gènes interrompus sont identifiés par le sauvetage des gènes et le séquençage.

Tags

Keywords: Enterobacter Sp. YSUAuxotrophsTransposon MutagenesisTn5 TransposomeM-9 Minimal MediumR6K Gamma Replication OriginKanamycin ResistanceSanger SequencingBLASTGene Identification

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