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Geração de<em> Enterobacter</em> Sp. YSU auxotrofos Usando Transposon Mutagênese
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Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Geração de<em> Enterobacter</em> Sp. YSU auxotrofos Usando Transposon Mutagênese

DOI:
10.3791/51934-v

•

13:31 min

•

October 31, 2014

•

1Department of Biological Sciences, Center for Applied Chemical Biology,Youngstown State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:27Electroporation of Competent Cells
  • 04:35Gridding Transformants and Replica Plating to Determine the Auxotroph Phenotype
  • 08:02Gene Rescue
  • 11:13Results: Generation of Auxotrophic Transformants in Enterobacter sp. YSU
  • 12:39Conclusion

Summary

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Enterobacter sp. YSU cresce em meio de sais mínimos de glucose. Auxotrofos são geradas através da transformação com um transposome qual se insere aleatoriamente no genoma do hospedeiro. Os mutantes são encontrados pela réplica de placas a partir de meio complexo para meio mínimo. Genes interrompidos são identificados por socorro e seqüenciamento genético.

Tags

Enterobacter Sp. YSUAuxotrophsTransposon MutagenesisTn5 TransposomeM-9 Minimal MediumR6K Gamma Replication OriginKanamycin ResistanceSanger SequencingBLASTGene Identification

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