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L'uso di stopped-flow fluorescenza ed etichettati nucleotidi di analizzare il ciclo Fatturato ATP di kinesine
JoVE 신문
화학
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JoVE 신문 화학
Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins
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L'uso di stopped-flow fluorescenza ed etichettati nucleotidi di analizzare il ciclo Fatturato ATP di kinesine

DOI:
10.3791/52142-v

•

07:25 min

•

October 17, 2014

•

, , ,
1School of Life Sciences,University of Nottingham

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:13Measurement of Association and Dissociation Rate Constants for mantATP
  • 04:18Measurement of the Dissociation Rate Constant for mantADP
  • 05:19Results: Analysis of the ATP Turnover Cycle of Kinesins
  • 06:45Conclusion

Summary

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Kinesine sono caratterizzati dall'interazione nucleotide-dipendente con microtubuli: un ciclo di fatturato ATP accoppiato ad un ciclo di interazione microtubuli. Qui, descriviamo i protocolli di analizzare la cinetica delle singole transizioni nucleotide nel ciclo fatturato ATP di una cinesina utilizzando nucleotidi fluorescente e stopped-flow fluorescenza.

Tags

KinesinATP TurnoverMicrotubuleStopped-flow FluorescenceFluorescently Labeled NucleotidesNucleotide Transition KineticsRapid MixingReaction Kinetics

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