December 29th, 2014
환경 풍부화는 신경 퇴행성 질환에 대한 잠재적인 보호 효과를 제공합니다. 그러나 현재로서는 농축 절차의 효능을 쉽게 결정할 수 있는 방법이 없습니다. 이 프로토콜은 환경 풍요로움의 효과를 밝히기 위해 동물의 인지 기능을 평가하는 간단한 "퍼즐 상자" 방법을 설명합니다.
다음 실험의 전반적인 목표는 생쥐의 인지 기능에 대한 환경 풍부화의 효능을 평가하는 것입니다. 이것은 먼저 두 개의 방이 포함된 퍼즐 상자를 만들어 달성합니다. 그런 다음 생쥐는 테스트 경기장에 익숙해지고 보호된 골 상자 입구를 발견할 수 있습니다.
다음으로, 쥐는 대피소 입구를 막고 있는 다양한 장애물이나 퍼즐에 도전합니다. 결과는 환경 강화가 퍼즐 상자의 성능을 안정적으로 향상시킨다는 것을 보여줍니다. 다른 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 상자를 구성하는 것과 구현하는 것 모두에서 쉽고 간단하며, 다양한 수준의 인지 부하로 작업을 설계하는 데 매우 유연하다는 사실입니다.
따라서 이 방법은 신경과학 분야의 다양한 질문, 특히 환경 개입의 효과 평가와 관련된 질문을 해결하는 데 사용할 수 있습니다. 이 방법은 환경 풍요로움이 인지에 미치는 영향에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 인간 질병의 유전자 변형 동물 모델 및 새로운 치료법의 전임상 테스트와 같은 다른 시스템에도 적용할 수 있습니다. 시작하려면 임신한 마우스를 표준 마우스 케이지에 배치하여 표준 사육 조건에 할당하거나 쥐 크기의 케이지에 배치하여 농축 조건에 무작위로 할당합니다.
감각 및 운동 자극을 증가시키도록 설계된 다양한 물체를 2-3일마다 농축 케이지에 넣습니다. 이러한 물체를 우리 안에서 이리저리 옮기고 젖을 뗄 때 파괴된 새끼를 새로 고치고, 풍요로운 상태를 위해 자란 환경과 일치하는 주거 조건으로 분리하십시오. 케이지당 3-10마리의 마우스가 있는지 확인하고 표준 그룹의 경우 2-5개의 마우스가 있는지 확인합니다.
행동 검사는 이 동물들이 성체가 되면 시작되어야 한다. 12주에서 14주가 되면 퍼즐 상자는 6개의 흰색 아크릴 조각으로 만들어지고, 측면에 사각형 구멍이 있는 검은색 아크릴 조각을 한쪽 끝에서 150mm 떨어진 곳에 놓아 상자를 두 개의 구획으로 나눕니다. 흰색 아크릴 조각을 작은 칸 위에 놓아 어두운 골 상자를 만듭니다.
아크릴 뚜껑은 경첩으로 메인 박스 본체에 고정하거나 동작 테스트 중에 완전히 제거할 수 있도록 자유롭게 둘 수 있습니다. 다음으로, 세 개의 아크릴 조각을 결합하여 다음 테스트 중에 장애물로 사용할 U자형 채널을 만듭니다. 먼저 알코올 70%로 퍼즐 상자를 깨끗이 청소합니다.
각 동물을 테스트하는 사이에 이 단계를 반복합니다. 다음으로 깨끗한 빨간 마우스, 이글루를 골 박스 안에 놓고 준비가 되면 뚜껑을 교체합니다. 골 박스를 향하는 열린 필드 섹션의 맨 끝에 마우스를 놓습니다.
즉시 타이머를 시작하고 동물이 다른 방에 들어가는 데 걸리는 시간을 기록하십시오. 타이머를 중지합니다. 동물의 네 발이 모두 골 상자 섹션에 들어가면 시험을 종료합니다.
동물이 미리 설정된 제한 시간 내에 골 박스에 들어가지 않는 경우. 시험이 끝나면 동물을 꺼내 별도의 케이지에 넣으십시오. 각 동물에 대한 시도 사이에 60-182번째 간격을 유지합니다.
5일 연속으로 하루에 3번의 시도를 수행합니다. 테스트 과정 전반에 걸쳐 각 조건에 대해 3번의 시도를 통해 4개의 방해 조건을 도입합니다. 먼저 앞서 구성한 U자형 채널을 도입하고 동물이 골 박스에 들어가 또 다른 장애물 조건을 만드는 데 걸리는 시간을 기록합니다.
도입될 수 있는 다른 장애물을 테스트하기 전에 채널 내부 및 주변에 침구를 배치하십시오. 출입구 내에 티슈나 폼 플러그를 놓는 것을 포함합니다. 주어진 방해 상태에 대한 세 번째 시도는 항상 다음 날에 시행되어야 합니다 테스트가 완료된 후, 동물이 지정된 시간 내에 작업을 완료하지 못한 null 테스트를 포함하여 각 테스트를 완료하는 데 걸린 시간을 계산합니다.
마지막으로, NOVA에 대한 반복 측정을 사용하여 퍼즐 상자 내의 성능에 대한 주택 상태의 영향을 평가합니다. 이 데이터는 풍부한 환경 또는 표준 환경에서 태어날 때부터 자란 성인 동물의 퍼즐 상자 작업 성능을 나타냅니다. 풍요로운 환경에서 자란 동물들은 표준 환경에서 자란 동물들보다 퍼즐 상자 안의 장애물 과제를 훨씬 더 빨리 풀었으며, 실험 2일과 4일 사이에 가장 큰 차이가 발생했다.
이 절차를 시도할 때 예기치 않은 스트레스 유발 행동을 방지하기 위해 동물을 적절하게 다루는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 따라서 이 절차에 따라 면역조직화학, 표적 외과 중재 또는 생체 내 전기 생리학과 같은 다른 방법을 사용하여 관찰된 행동 효과의 기저에 있는 메커니즘을 밝힐 수 있습니다. 따라서 이 비디오를 시청한 후에는 AMA 모델에서 인지 기능에 대한 효율적이고 신뢰할 수 있는 예비 평가를 얻는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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이 연구는 단순한 퍼즐 박스 방법을 사용하여 쥐의 인지 기능에 대한 환경 개선의 효과를 평가합니다. 결과는 환경 개선이 신뢰할 수 있는 방법으로 인지 성능을 향상시킨다는 것을 나타냅니다.