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La movilidad electroforética cambio de ensayo (EMSA) para el estudio de las interacciones RNA-proteína: El IRE / IRP Ejemplo
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) for the Study of RNA-Protein Interactions: The IRE/IRP Example
DOI:

12:44 min

December 03, 2014

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:28Preparation of Protein Extracts from Cultured Cells
  • 03:05Preparation of Protein Extracts from Mouse Liver and Spleen
  • 04:56Synthesis of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
  • 05:55Purification of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
  • 07:48Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)
  • 10:27Results: The Iron-dependence of IRE/IRP Interactions
  • 12:17Conclusion

Summary

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Aquí se presenta un protocolo para analizar las interacciones RNA / proteína. El ensayo de cambio de movilidad electroforética (EMSA) se basa en la migración diferencial de los complejos de ARN / proteína y ARN libre durante la electroforesis en gel nativo. Mediante el uso de una sonda de RNA radiomarcada, complejos / proteína de ARN pueden ser visualizados por autorradiografía.

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