Whole-Mount In Situ Hybridisierung

Vollständig-hängen in Situ Hybridisierung (WMISH) ist eine verbreitete Methode zur Visualisierung von des Speicherort der zum Ausdruck gebrachten RNAs in Embryonen. In diesem Prozess synthetisch hergestellte RNA-Sonden sind erste komplementär gebunden, oder “hybridisiert,” um die Transkripte der Zielgene. Immunohistochemistry oder Fluoreszenz wird dann verwendet, um diese RNA-Hybriden erkennen enthüllt räumlichen und zeitlichen Muster der Genexpression. Im Gegensatz zu traditionellen in Situ Hybridisierung Techniken, die dünne Gewebeschnitte deren Bilder rechnerisch zusammengesetzt werden müssen erfordern, ermöglicht die gesamte-Mount-Technik gen Expressionsmuster über den gesamten Embryo oder Struktur beurteilt werden.

Dieses Video führt die grundlegenden Konzepte der ganze Berg Färbung und Detail wichtige Verfahrensschritte, einschließlich Sonde Design und Produktion, Embryo Fixierung und Färbung, und Post-Hybridisierung Signalerkennung. Zuschauer werden dann lernen über wie Entwicklungs Biologen WMISH auf aktuelle wissenschaftliche Studien anwenden.