This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 00:39Cell Culture for Immunofluorescence Microscopy
- 01:32Preparation of Transfection Complex and Transfection of Cells
- 03:08Live Cell Imaging and Indirect Immunofluorescence
- 05:40Results: Identifying Kinesin Cargo via Fluorescence Microscopy
- 06:50Conclusion
Hier wordt een protocol voorgelegd aan Kinesin-1 ladingen te identificeren. Een motorloze mutant van de kinesine-1 zware keten (KIF5B) aggregaten in het cytoplasma en induceert aggregatie van de ladingen. Beide aggregaten gedetecteerd onder fluorescentiemicroscopie. Een soortgelijke strategie kan worden toegepast om ladingen van andere auto eiwitten te identificeren.
Tags
Kinesin-1CargosFluorescence MicroscopyMolecular MotorsDominant Negative KIF5B MutantsLive Cell ImagingIndirect Fluorescence ImagingImmunofluorescent StudiesCover GlassesCell CultureTransfection MediumTdTomato-tagged Wild Type KIF5B Expression PlasmidMotorless KIF5B Expression PlasmidCandidate Cargo Protein
