This content is Free Access.
Chapters
- 00:05Title
- 00:39Cell Culture for Immunofluorescence Microscopy
- 01:32Preparation of Transfection Complex and Transfection of Cells
- 03:08Live Cell Imaging and Indirect Immunofluorescence
- 05:40Results: Identifying Kinesin Cargo via Fluorescence Microscopy
- 06:50Conclusion
Здесь, протокол представлен для идентификации Кинезин-1 грузов. Безмоторных мутант тяжелой цепи Кинезин-1 (KIF5B) агрегирует в цитоплазме и индуцирует агрегацию его грузов. Оба агрегаты обнаруживаются при флуоресцентной микроскопии. Аналогичный подход может быть использован для идентификации грузов других моторных белков.
Tags
Kinesin-1CargosFluorescence MicroscopyMolecular MotorsDominant Negative KIF5B MutantsLive Cell ImagingIndirect Fluorescence ImagingImmunofluorescent StudiesCover GlassesCell CultureTransfection MediumTdTomato-tagged Wild Type KIF5B Expression PlasmidMotorless KIF5B Expression PlasmidCandidate Cargo Protein
