Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

Laura Ordov&#225;s; Ruben Boon; Mariaelena Pistoni; Yemiao Chen; Rangarajan Sambathkumar; Nicky Helsen; Jolien Vanhove; Pieter Berckmans; Qing Cai; Kim Vanuytsel; Susanna Raitano; Catherine M. Verfaillie

doi:10.3791/54718

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Generación rápida y eficiente de las células madre pluripotentes recombinante humana mediada por la recombinasa Cambio en el cassette AAVS1 Locus

JoVE 신문
의학

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Rapid and Efficient Generation of Recombinant Human Pluripotent Stem Cells by Recombinase-mediated Cassette Exchange in the AAVS1 Locus

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Generación rápida y eficiente de las células madre pluripotentes recombinante humana mediada por la recombinasa Cambio en el cassette AAVS1 Locus

DOI:

10.3791/54718-v

•

11:36 min

•

November 20, 2016

•

Laura Ordovás*¹, Ruben Boon*¹, Mariaelena Pistoni, Yemiao Chen, Rangarajan Sambathkumar, Nicky Helsen, Jolien Vanhove, Pieter Berckmans, Qing Cai, Kim Vanuytsel, Susanna Raitano, Catherine M. Verfaillie

¹Stem Cell Institute,Katholieke Universiteit Leuven

Chapters

00:05Title
00:58Preparation of FRT-containing hPSC Line for Transfection
04:44Transfection by Nucleofection
06:28Positive and Negative Selection of Cells Undergoing RMCE
07:28Expansion and Characterization of RMCE Lines
08:31Results: RMCE in the AAVS1 of hPSC
10:51Conclusion

Summary

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Aquí se presenta un método de edición gen rápida y eficiente basado en RMCE en el locus de AAVS1 humanas pluripotentes células madre (hPSCs) que mejora los sistemas anteriormente descritos. Usando esta técnica, líneas isogénicas se pueden generar rápida y fiable para los estudios comparativos adecuados, facilitar la investigación transgénesis mediada con hPSCs.

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Generación rápida y eficiente de las células madre pluripotentes recombinante humana mediada por la recombinasa Cambio en el cassette<em> AAVS1</em> Locus

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