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Tridimensional Super Resolution Microscopia de filamentos de actina F por Interferometric fotoativado Localization Microscopy (iPALM)
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JoVE 신문 생물학
Three-dimensional Super Resolution Microscopy of F-actin Filaments by Interferometric PhotoActivated Localization Microscopy (iPALM)

Tridimensional Super Resolution Microscopia de filamentos de actina F por Interferometric fotoativado Localization Microscopy (iPALM)

DOI:
10.3791/54774-v

•

11:57 min

•

December 01, 2016

•

,
1Department of Biology,South University of Science and Technology of China, Shenzhen, 2Mechanobiology Institute, Singapore, 3Department of Biomedical Engineering,National University of Singapore

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:55Imaging Specimen Preparation
  • 03:11Sample Placement and iPALM Alignment
  • 05:29Calibration of the iPALM Setup
  • 07:47Data Acquisition
  • 09:09Results: Actin Cytoskeleton of Adherent Mammalian Cells Visualized by iPALM with Sub-20 nm Spatial Resolution in 3D
  • 10:55Conclusion

Summary

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Nós apresentamos um protocolo para a aplicação de interferometria fotoativado Localization Microscopy (iPALM), um método de microscopia de super-resolução 3-dimensional única molécula localização, à imagem do citoesqueleto de actina em células de mamíferos aderentes. Esta abordagem permite a visualização à base de luz de características estruturais em nanoescala que, caso contrário permanecem sem solução por microscopia óptica limitado por difração convencional.

Tags

Keywords: 3D Super Resolution MicroscopyIPALMF-actin FilamentsUltrastructural VisualizationSingle Molecule LocalizationCell Sample PreparationImaging BufferCover Glass AssemblyEpoxy SealingNewton’s Rings Pattern

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