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On-line Tamanho-exclusão e cromatografia de troca iônica em uma SAXS Beamline
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Online Size-exclusion and Ion-exchange Chromatography on a SAXS Beamline

On-line Tamanho-exclusão e cromatografia de troca iônica em uma SAXS Beamline

DOI:
10.3791/54861-v

•

11:09 min

•

January 05, 2017

•

, ,
1Structural Biology Group,European Synchrotron Radiation Facility, 2European Molecular Biology Laboratory, 3School of Chemical and Physical Sciences,Keele University, 4Groupe de Microscopie Electronique et Méthodes,Institut de Biologie Structurale

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:51Size-exchange Chromatography (SEC)-Small Angle X-ray Scattering (SAXS) Data Collection
  • 03:46Ion-exchange Chromatography (IEC)-SAXS Data Collection
  • 07:37SAXS Data Reduction and Analysis
  • 08:59Results: SEC- and IEC-SAXS Analysis of D5323-785
  • 09:55Conclusion

Summary

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A determinação da estrutura da solução de proteína por um pequeno ângulo de dispersão de raios-X (SAXS) requer amostras monodispersas. Aqui, apresentamos duas possibilidades para assegurar atrasos mínimos entre a preparação da amostra e aquisição de dados: cromatografia em linha de exclusão de tamanho (SEC) e cromatografia de troca iônica em linha (IEC).

Tags

Keywords: Online Size-exclusion ChromatographyIon-exchange ChromatographySAXS BeamlineStructural BiologySAXSMolar Dispersed SamplesSECGel Filtration BufferHPLC SystemSAXS Flow-through CapillaryRadiation DamageProtein SampleAggregatesHPLC Compatible Glass VialUV Vis Data

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