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생물학

Stabile Zelllinien zur Untersuchung von Proteinfunktionen, Spatiotemporal Lokalisierung und Protein Interaction Networks induzierbare LAP-getaggt

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Inducible LAP-tagged Stable Cell Lines for Investigating Protein Function, Spatiotemporal Localization and Protein Interaction Networks

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Stabile Zelllinien zur Untersuchung von Proteinfunktionen, Spatiotemporal Lokalisierung und Protein Interaction Networks induzierbare LAP-getaggt

DOI:

10.3791/54870-v

•

11:04 min

•

December 24, 2016

•

Michelle Bradley, Ivan Ramirez, Keith Cheung, Ankur A. Gholkar, Jorge Z. Torres^2,3

¹Department of Chemistry and Biochemistry,University of California, Los Angeles, ²Molecular Biology Institute,University of California, Los Angeles, ³Jonsson Comprehensive Cancer Center,University of California, Los Angeles

Chapters

00:05Title
00:44Generation of an Inducible Stable Cell Line that Expresses the LAP-tagged Gene of Interest
02:06Purification of LAP-tagged Protein Complexes
08:10Identify Interacting Proteins by Mass Spectrometry Analysis
09:12Results: Evaluation of a LAP-Tau HEK293 Inducible Cell Line
10:32Conclusion

Summary

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We describe a method for generating localization and affinity purification (LAP)-tagged inducible stable cell lines for investigating protein function, spatiotemporal subcellular localization and protein-protein interaction networks.

Stabile Zelllinien zur Untersuchung von Proteinfunktionen, Spatiotemporal Lokalisierung und Protein Interaction Networks induzierbare LAP-getaggt

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