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면역학 및 감염병학
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Abbilden der Neutrophilen Phagosomen und Zytoplasma Mit einem Ratiometrisch pH-Indikator
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Imaging the Neutrophil Phagosome and Cytoplasm Using a Ratiometric pH Indicator
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Abbilden der Neutrophilen Phagosomen und Zytoplasma Mit einem Ratiometrisch pH-Indikator

DOI:
10.3791/55107-v

•

12:42 min

•

April 05, 2017

•

, , , ,
1Centre for Molecular Medicine, Division of Medicine,University College London, 2Cell and Developmental Biology,University College London

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:05S-1 Coupling to Heat-killed (HK) Candida
  • 03:19Isolation of Neutrophils
  • 05:20Preparation of Slides
  • 07:27Confocal Microscopy
  • 08:57Image Analysis
  • 10:06Results: Images of Neutrophils from Humans and Mice
  • 11:29Conclusion

Summary

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Diese Handschrift beschreibt eine einfache Methode, um die phagosomalen und pH-Bereich sowie die cytoplasmatische pH von menschlichen und Maus-Neutrophilen unter Verwendung des ratiometrischen Indikatoren seminaphthorhodafluor (SNARF) -1, oder S-1 zu messen. Dies wird in lebenden Zellen konfokale Fluoreszenzmikroskopie und Bildanalyse erreicht werden.

Tags

NeutrophilPhagosomeCytoplasmPH IndicatorConfocal MicroscopyNADPH OxidasePhagocytic VacuoleIon FluxesCarboxy-S-1 Succinimidyl EsterCandidaOpsonizationHuman NeutrophilsPeripheral BloodDextran

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